Bilirubina w proszku CAS 635-65-4ekstrahowany jest głównie z żółci. Bilirubina jest nierozpuszczalna w wodzie, rozpuszczalna w rozpuszczalnikach organicznych, takich jak benzen, chloroform i dwusiarczek węgla, oraz słabo rozpuszczalna w etanolu i eterze. Bilirubinę można również rozpuścić w gorącej mieszaninie etanolu i chloroformu. Sól sodowa bilirubiny jest łatwo rozpuszczalna w wodzie, ale jej sole wapnia, magnezu i baru są w wodzie nierozpuszczalne. Bilirubina jest jednoskośnym kryształem o jasnopomarańczowym lub głęboko czerwonawo-brązowym kolorze. Jego sucha substancja stała jest stosunkowo stabilna, a roztwór chloroformowy jest również stosunkowo stabilny w ciemności. Jest niestabilny w roztworze zasadowym (takim jak wodorotlenek sodu 0,1 mmol/l) lub w obecności trójwartościowych jonów żelaza i szybko utlenia się do biliwerdyny. Bilirubina może wiązać się z glicyną, alaniną lub histydyną. Dodanie białka surowicy, witamin lub EDTA może ustabilizować bilirubinę.
1. Przygotowanie soli wapniowej metodą pośredniej ekstrakcji soli wapniowej: dodać 3-3,5-krotność nasyconego supernatantu wody wapiennej do świeżej żółci wieprzowej, mieszając, a następnie kontynuować mieszanie przez 5-10min, Ph{ {4}}, po podgrzaniu gazą do temperatury 50 usunąć pianę, kontynuować podgrzewanie do wrzenia, trzymać przez 2 minuty, ostudzić, przesączyć i otrzymać sól wapniową. Przygotowanie gotowego produktu zawierającego bilirubinę: Weź sól wapniową i dodaj 0,8-krotną ilość wody, aby uzyskać pastę, przesiej ją przez sito 30-40, dodaj 0,3% przeciwutleniacza do przesączu, dodaj sól i kwas aby doprowadzić pH do 1,5, odstawić na 4 godziny, przesączyć, dodać do placka filtracyjnego 8-10-krotną ilość 80% etanolu, rozdrobnić i dobrze wymieszać, dodać przeciwutleniacz, odstawić na noc i uzyskać osad. Dodać 4-6-krotną ilość 80% lub więcej etanolu i przeciwutleniacza, wymieszać i namoczyć przez noc. Powtórz ten proces 3-4 razy i osusz osad w temperaturze poniżej 70 stopni, aby otrzymać gotowy produkt w postaci bilirubiny.
Wytrącanie soli wapniowej [HCl, ciężki siarczyn sodu] → wytrącanie [etanol, ciężki siarczyn sodu] → wytrącanie [70 stopni ] → produkt bilirubiny.
2.Wytwarzanie bilirubinianu wapnia metodą ekstrakcji chloroformem: Świeżą żółć wieprzową doprowadza się do pH 12 za pomocą wodorotlenku sodu, podgrzewa do wrzenia, dodaje się roztwór chlorku wapnia, następnie podgrzewa do wrzenia, schładza i sączy w celu otrzymania bilirubinianu wapnia. Żółć świńska [NaOH, CaCl2] → [pH 12, 100 stopni ] Przygotowanie proszku bilirubiny CAS 635-65-4 sól wapniowa bilirubina gotowy produkt: sól wapniową bilirubiny doprowadza się do pH 1-2 za pomocą kwasu chlorowodorowego 1:1, kwaśną wodę odsącza się, chloroform ekstrahuje chloroformem, przemywa bezwodnym etanolem i roztwór pozostawia w temperaturze około 5 stopni w celu otrzymania gotowego produktu w postaci bilirubiny.
Sól wapniowa bilirubiny [HCl] → [pH1-2] związek kwasowy [chloroform, etanol bezwodny] → [5 stopień ] gotowy produkt bilirubiny
3. Ulepszona metoda zakwaszania solą wapniową za pomocą soli wapniowej: Weź świeżą żółć wieprzową i dodaj 1% wodorotlenku wapnia, dobrze wymieszaj, szybko podgrzej do 90-97 stopnia, trzymaj w cieple przez 10 minut i przefiltruj, aby uzyskać sól wapniowa. Podgrzanie do 40 stopnia spowoduje pojawienie się tłuszczu, który można delikatnie usunąć. Otrzymaną sól wapniową można jednorazowo przemyć gorącą wodą w celu usunięcia nadmiaru alkaliów i innych zanieczyszczeń. Weź sól wapniową i dodaj ponad 10-krotną ilość wody, aby ją równomiernie rozprowadzić. Dodać 1% przeciwutleniacza i mieszać (60 obr./min), aby dodać kroplami kwas solny 1:2. W ciągu 40 minut osiągnąć pH 2,0 i poczekać, aż pH pozostanie niezmienione, aby uzyskać substancję kwaśną. Żółć świńska [1% wodorotlenek wapnia] → [90-97 stopień, 15min] Sól wapniowa żółci [przeciwutleniacz, kwas solny] → [pH2,40min] Kwaśne płukanie alkoholem, płukanie wodą: Zakwaszona bilirubina jest równomiernie rozproszona w temperaturze pokojowej przy 10-krotnej ilości etanolu, pH nie powinno być wyższe niż 5, dodaje się 0,5% przeciwutleniacza, miesza i pozostawia na około 1 godzinę do nałożenia warstw. Przejdź do górnej warstwy roztworu alkoholu i zbierz wytrąconą bilirubinę. Przemyj bilirubinę ciepłą wodą o temperaturze 50 stopni przez około 5 minut, zbierz pływającą bilirubinę, szybko dodaj etanol w celu odwodnienia i usuń etanol, aby uzyskać surową bilirubinę. Związek kwasowy [etanol] → [1h] wytrącanie bilirubiny [50 stopni gorąca woda] → [etanol] ekstrakcja surowej bilirubiny, odparowanie, krystalizacja i suszenie: Weź surową bilirubinę i dodaj 10-krotny chloroform i wytrząsaj w temperaturze 50 stopni przez 10 minut. W razie potrzeby ekstrahuj 2-3 razy, a pozostałość powinna być biała. Ekstrakt chloroformowy poddano destylacji próżniowej do prawie suchego wyniku, w wyniku czego utworzyła się większość kryształów bilirubiny. Po ochłodzeniu do temperatury pokojowej dodano etanol i dalej chłodzono do 4 stopni przez 10 minut. Kryształy bilirubiny przesączono i potraktowano bezwodnym etanolem lub eterem, a następnie wysuszono pod próżnią w celu uzyskania bilirubiny wysokiej jakości.
Bilirubina surowa [chloroform] → [10min] roztwór chloroformu [krystalizacja] → bilirubina wysokiej jakości
4.Przygotowanie roztworu do hydrolizy metodą ekstrakcji żywicą jonowymienną: Pobrać świeżą żółć krowią, przesączyć ją przez gazę, dodać roztwór wodorotlenku sodu o stężeniu 2 mol/L, mieszając, aby doprowadzić pH do 10, zagotować i przesączyć, aby uzyskać hydrolizat.
Adsorpcja i elucja kwasu żółciowego przez kolumnę z żywicą z roztworem hydrolizy: Wlać przegotowany roztwór hydrolizy do podgrzanej kolumny z żywicą, aż kolor wycieku stanie się ciemniejszy, a adsorpcja zostanie nasycona.
Dodawaj zimną wodę, aż temperatura wewnątrz kolumny spadnie do temperatury pokojowej, a następnie dodaj rozcieńczony roztwór chlorowodorku wodorosiarczynu sodu ze szczytu kolumny, aby pH ścieków wynosiło 1.
Przemyć 75% etanolem, zebrać, gdy eluent stanie się ciemnozielonym, mętnym roztworem i przemywać, aż wyciek stanie się klarowny, a pH będzie bliskie obojętnemu. Przemyć ponownie 95% etanolem.
Zbierz roztwór do elucji etanolem w celu przygotowania kwasu żółciowego. Roztwór do hydrolizy [kolumna jonowymienna] → [75% etanol, 95% etanol] Eluent etanolowy do elucji, zatężania i suszenia bilirubiny: Uwolnić cały 95% etanol z kolumny, zanurzyć w chloroformie na 10 minut i zebrać eluent chloroformowy do momentu, aż pojawia się żółty kolor.
Oddestyluj eluent chloroformowy do prawie suchości, dodaj bezwodny etanol i kontynuuj odzyskiwanie, aż nie będzie już chloroformu. Przesączyć na gorąco, zebrać bilirubinę, wysuszyć i otrzymać gotowy produkt w postaci bilirubiny.
Yolanda
Telefon komórkowy: +86 -29-86107037-8012
E-mail:sales9@konochemical.com
Tel/Wechat: 18729555803